ROSA DE BENGALA

PRACTICA

ROSA DE BENGALA

Antígeno Brucelar Amortiguado para el Diagnóstico de Brucelosis

 

INTRODUCCION

 

Es una  prueba, basada en la aglutinación como respuesta a la presencia de alguna de las aglutininas de Brucella (abortus, mellitensis y suis). Bacterias causantes de la Brucelosis, organismos virulentos e infecciosos para el hombre que adquiere generalmente por vía mucocutánea, por consumir carne contaminada con la bacteria, abrasiones o cortes en la piel, inhalación de aerosol o contaminación de la conjuntiva; invadiendo el sistema linfático y puede alcanzar a diversos órganos.

Por ello se realiza la prueba de Rosa de Bengala por ser una prueba sensible y rápida que permite una aproximación diagnóstica inmediata.se empela sobre todo en las zonas no endémicas, como método de "despistaje". Emplea como antígeno una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del enfermo.

 

DESARROLLO

  

MATERIAL

• Placa cóncava
• Puntillas
• Cronómetro

 

EQUIPO

• Pipeta semiautomática
• Microscopio

 

MUESTRA

• Suero (Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)

 

 

REACTIVO

• Antígeno Rosa de Bengala
• Control Positivo de Brucella
• Control Negativo de Brucella

  

PROCEDIMIENTO

1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero.
2. Utilizando la pipeta automática adicione 30 μL de la muestra del paciente e un círculo de la placa.
3. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después  coloque 30 μL en la placa de prueba, en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles.
4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. 

 Nota : Después de este tiempo(4 min.) la lectura ya no es válida. 

  

 

RESULTADO E INTERPRETACION

La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar

Es el tiempo límite óptimo para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente puesto que se pueden presentar reacciones no específicas.

 

 

			Valores de referencia
Paciente 1	Negativo		CONTROL POSITIVO Presencia de aglutinación indica la existencia de anticuerpos específicos.
Paciente 2	Negativo		CONTROL NEGATIVO Ausencia de aglutinación.

 

RESULTADOS

 

Ambos resultados fueron negativos lo que indica que los pacientes no tienes Brucelosis o no han estado en contacto con la bacteria indicada.

Se pueden presentar falsos negativos, que se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado.

NOTA: El aislamiento del agente etiológico mediante hemocultivos es de suma importancia.

 

EVIDENCIAS

 

 



 

CONCLUSIONES

Esta prueba cualitativa de Rosa de Bengala es un método considerado eficaz en el diagnóstico de brucelosis, que permite dar al paciente un tratamiento en caso de que sea positivo el resultado, sin embargo por tratarse de una prueba cualitativa se debe comprobar con algunas otras como: Aglutinación Lenta Estándar o Aglutinación Lenta en Presencia de 2-Mercaptoetanol.

 

COMENTARIO

Es una practica fácil de realizar al igual que las realizadas anteriormente.
La respuesta secundaria originada por el complejo Ag-Ac, es una aglutinación que es usada para la detección del antígeno de brucella.

Rosa de bengala detecta solo si esta presente o no la bacteria. Aunque, es un método con una especificidad alta, suele presentar un reacción cruzada con las aglutininas de la tularemia y en los sueros positivos deben realizarse pruebas para ambas enfermedades.
El uso de un inmunoensayo suele ser mas especifico y sensible que las pruebas de aglutinación.  
 

 

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www.cyrlab.com.mx/Portals/0/Insertos/Licon/antigeno-de-rosa-de-bengala.pdf

http://www.linear.es/ficheros/archivos/322_2210005cas.PDF